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熒光定量PCR耗材的使用和選擇
  • 釋出日期☁•▩·│:2021-04-09      瀏覽次數☁•▩·│:1304
    • 高通量的96孔PCR板和8聯管是在聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中•│☁,主要作為參與擴增反應的引物·•✘╃☁、Taq DNA聚合酶·•✘╃☁、dNTP·•✘╃☁、模板核酸·•✘╃☁、Mg·•✘╃☁、緩衝液等的承載物╃·✘·•。醫療級聚丙烯(PP)材質因其高的純淨度和穩定性•│☁,能更好適應PCR反應過程中反覆高低溫設定•│☁,並且能夠實現高溫高壓滅菌操作•│☁,常常被用於PCR耗材的生產╃·✘·•。隨著熒光定量PCR技術的普及•│☁,該技術被廣泛用於遺傳·•✘╃☁、生化·•✘╃☁、免疫·•✘╃☁、醫藥等領域•│☁,不僅應用於基因分離·•✘╃☁、克隆和核酸序列分析等基礎研究•│☁,還可用於疾病的診斷或任何有DNA•│☁,RNA的研究領域╃·✘·•。

      如何正確使用96孔PCR孔板

      • PCR板有透明和乳白色可選•│☁,其中乳白色更適合用於頂部採集熒光訊號的新型熒光定量PCR儀(如伯樂CFX系列•│☁,ABI 7500fast 以上型號•│☁, Roche 480系列)•│☁,但如果熒光定量PCR儀是底部光源的•│☁,則應選擇透明的╃·✘·•。

      • PCR板根據裙邊設計又可分為無裙邊·•✘╃☁、半裙邊和全裙邊三種設計模式•│☁,不同廠家的熒光定量PCR儀會設計不同的切角或邊緣凸起•│☁,請選擇適合該PCR儀的板子╃·✘·•。

      • PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板)•│☁,根據機型的不同選擇•│☁,選擇不同高度孔板•│☁,避免高度錯誤對機器造成破壞和加熱不均導致資料失真╃·✘·•。

      • 當使用96孔板做熒光定量PCR實驗的時候•│☁,推薦使用光學膜代來密封反應孔╃·✘·•。正確的封膜方法是☁•▩·│:先沿著96孔板的縱向壓膜•│☁,然後橫向•│☁,最後沿著板的邊緣按壓使之密封╃·✘·•。具體手法見下面圖示☁•▩·│:

      • 加樣後會在管壁上飛濺一些小液滴•│☁,另外反應體系內也會有一些氣泡•│☁,需要離心去掉掛壁液滴和氣泡╃·✘·•。請使用的微孔板離心機解決上述問題╃·✘·•。

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      18017111930

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